Шпаргалка по цитологии

6) Многокл орг-м -новая сист.- сложн. ансамбль из мн-ва клл, объед. и интегрированный в подсистт. тканей и органов, связ. друг с другом с помощью хим. факторов.

2. Ядерно-цитоплазматический транспорт

-м-лы до 60 кДа(d=9нм)проникают через поры свободно, по gradC(пассивная диффузия), v~m

-более крупные м-лы проходят с помощью акт.транспорта (Еатф, белки-переносчики)

-транспортные белки(шаттлы= «челноки»)

--эксопртины(выводят пре-рибосомы, тРНК, и/рРНП)

--импортины(вводят белки: ламины, для мяРНП, гистоны, кислые белки)

-для импорта необх.:1)NLS(nuclear localisation sequence) последовательность, 2) рецептор(нуклеопорины), 3)АТФ(для транслокации)

--подробнее: [импортин-α+импортин-β+cargo]→ в ядро → +GTP=>[GTP+импортин- β] +импортин-α +cargo; cargo ост.в ядре, ост.возвр.в цитоплазму; в цитоплазме: +GAP=> импортин- β +GDP+P(возвр.в ядро)

-для экспорта необх.:1)NES(nuclear export sequence), 2)GTP, 3)белки

--подробнее: [cargo(NES)+exportin-1+GTP(Ran)]→через поровый комплекс , из ядра→в цитопл. под возд. GAP (GTP Associating Protein) →(GDP(Ran)+P)+exportin-1 +cargo; cargo ост.в цитоплазме, ост.возвр.в ядро; в ядре: GDP(Ran)+RCC-1→GTP(Ran)

-Сущ. белки-транспортеры (РНКнаружу); транспорт, если:

1) правильная(не дефектная) последовательность РНК,

2) завершен сплайсинг(нет интронов),

3) исп-ся белок-транспортер-(гетерогенный)hnRNPA1

--в пор.комплексе меняется оболочка cargo: в ядре CBC(cap binding complex), в цитоплазме PABP (poly A binding protein)

3. Ядерная оболочка, её структура и роль

-ЯО сост.из 2х мембран(внеш и внутр), между ними перинукл. простр-во; внутр. связ. с ламиной, наруж.-с риб. и глЭР; ЯО имеет ядерные поры (отл. от МХ иХЛ)

-ЯО-регулятор ядерно-цитоплазм.транспорта, при этом комплекс яд.поры – транслокатор и сортировщик

--пониж метаболич.акт-сть=>пор меньше(эритроцит)

-наруж.мембрана:интегр., транмп.белки

-внутр.мембрана:транспорт только через поры

--LBR(lamini binding receptor); LAP-1,LAP-2(lamin assoc.protein), эмерин – интегр.белки, связ.внутр.мембр. с ламиной

-ламина имеет решетчатую структ. (замораживание, скалывание, напыление, травление)

-ламина “заякоривает” хроматин на внутр.мембране

РОЛЬ:

1)ЯО характ.для ЭУ, обособляет синтез Р/ДНК от синтеза белка=>регуляция клет.акт-сти; 2)3-мерная структ.интерФ-ного ядра(часть-ЯБМ); 3)регуляция ядерного “импорта” и “экспорта”

-ЯО восстанавливается из поровых комплексов, ламины и везикул

4. Стр-е и ф-ции яд.поры(ЯП)

-компл.ЯП сост.из белков нуклеопоринов

--М у дрожжей –50 МДа=30 белков, у позвоночных 120 МДа=50-100 белков

-во всех моделях ЯП присутствует внутриядерная корзина (h=200нм)

-одна из моделей: 2 ”кольца”(d=120 нм) – цитоплазм. И ядерное(по 8 субъединиц), “спицы”(80нм – d поры), центр.гранула(10-40нм), “корзина”

-Ф-ЦИИ: 1)транслокатор (мех.сито,по gradC),2) сорт-щик (рецепция и сегрегация)

5.Локализация хр-м в интерФ-м ядре

ИнтерФ-рабочая Ф кл-ного ядра или t,когда хр-мы функц-ют. На этой Ф хр-мы б.ч. деконденсируются.

Степень деконденсации ~ активности (min-const метаболически неактивн.уч-ки структ. гетероХ).

Кроме периферич. слоя Х,с яд.оболочкой находятся в контакте специфч. уч-ки хр-м, такие, как половые хр-мы, околоцентромерные уч-ки гетероХ, теломерные хромоцентры, гетероХ,ассоц.с ядрышком и др.(дифф. окраска на гетероХ).=>Ведущая роль этой связи (преимущ. связь гетероХ с яд.оболочкой)

Сущ. модель орг-ции интерФ-ного ядра: развернутая хр-ма в интерФ "заякорена" на ядерной оболочке с помощью гетероХ-вых уч-ков (теломерный гетероХ, прицентормерный гетероХ, околоядрышковый гетероХ, вставочные зоны гетероХ), так,что её расположение становится фикс. в простр-ве ядра, часто повторяя телоФ-ную ориентацию, и занимает в нем соотв. V.

Кроме компактных уч-ков гетероХ сущ. больш. ч-ло конденс. уч-ков эуХ.

6.Полиплоидия, политения, их значение

полиплоидия(П)-увеличение с (кол-ва ДНК).

(эуплоидия-кратно 2n,анэуплоидия-не кратно 2n-чуть меньше/больше-признак рака)

(П)-рез-т нарушения фаз клеточного цикла.

А)полиплоидизирующий М (нет цитокинеза)-развитие человеч. печени

Б)колхицино~М(К-М)-(выпадает телоФ и анаФ)-нет расхожд. в метаФ-кардиомиоциты

В)М выпадает (не пост.)-при облучениях, обр. полиплоидные лимфоциты(эндорепликация-нет М однократно)

Г)политенизация(многонитчатость)-у насекомых (мотыль-личинка хирономуса, человеч. эмбрион-трофобласт -кл. пуповины) - (репл->покой->Терм.)

Д)слияние->дикарион

Е)n ядер -> поликарион (10-20), >20ядер->симпласт (поперечно -полосатая мм.)

Ж)многополюсный М -расхожд. хр-м, обр-е неск. ядер(похоже на Д)

пуф-место транскрипции (синтез РНК),диски-зарепрессированные хр-мные ус-ки

пуф-врем-е обр-е(аналогично "ёлочкам"ядрышек ооцитов рыб)

знач.-увеличение размера->продуктивности,рост органов

7. Ядерный белковый матрикс(ЯБМ)

-белковый компонент, "держащий" структ.ядра

-ДНК имеет участки, взаимод.с ЯБМ специфич.образом

-экстркция ядерных компонентов в процессе выделения ЯБМ:(пс.этих действий ядро не теряет своей целосности)

--0.2 мМ MgCl2-связать белки(чтобы сохранить матрикс),

--2M NaCl-гипотонич р-р(для удаления всех гистонов),

--1% тритон Х100(неионный детергент)-разрушение ядерной оболочки,

--ДНК-аза и РНК-аза-отщепление ДНК и РНК.

-ЛАМИНА(Л)-подстилает внутр.мембрану яд.оболочки

-белки,вход.в состав Л:ламины А,В,С

-Л соединяет яд.оболочку и конденс.Х

-ЯБМ=(Л)+остатки ядрышка (белковый матрикс) +поровые комплексы+ (межхроматиновая белковая сеть матрикса) (Збарский,Ченцов,Георгиев)

-ЯБМ-не артефакт,т.к.связь с ДНК-специфич.и функц.

-Состав ЯБМ:

--белок97,ДНК0.1,РНК1.2,фосфолипиды1.1(крысиная печень)

--белок92.3,ДНК1.2,РНК0.05,фосфолипиды6.9(HeLa)

---ДНК: 10000 нукл.посл.- сателлитные,120-140-гетерогенные

---РНК: гетерогенно-ядерная, рРНК, тРНК, малая ядерная

-транскрипция связана с ЯБМ(располагает участки Д/РНК опр.образом)

-Сущ. артефакт-белковый остов внутри хр-мы(scafull)-он обнаруживается только тотально(т.е.только из белков)

11. Док-ва непр-сти хр-м в течние клеточного цикла

В интерфазном ядре не видно хр-м, подобных митотическим (они там есть).

1. Наблюдения Бовери(1907) за морф. постоянством хр-м при делении бластомеров аскариды→хар-р распол-я хр-м в телоФ опр-т форму интерфазного ядра и порядок распол-я хр-м в след. профазе (это посл.основой для теории↑).

2. (косв)Пост-во ч-ла и морфологии хр-м для данного кариотипа нельзя объяснить при «разборке» хр-м.

3. Закономерно повт-ся расположение хр-м в метафазных пластинках

4. Правило Тейлора(1964)→воспроизв-е хр-м сходно с полуконсервативной редупликацией ДНК (метка Н3Т сохр-ся в одной хр-ме пс. деления).

5. Индивид. хр-мы иногда можно наблюдать в интерФ-х ядрах(тельце Барра).

6. В ряде объектов возм. выявление теломерных уч-ков хр-м в интерФ-х ядрах(хромоцентры итерФ-х ядер клеток меристемы корешков лука-теломерные уч-ки хр-м--радиоавтограф)

7. Центромерные уч-ки хр-м в интерФ-х ядрах выявл-ся диффер. окраской на гетерохроматин(культура фибробластов мыши).

8. Зоны локализации отд. хр-м можно выявить и в интерФ-х ядрах, не имеющих хромоцентров или конденсрованных уч-ков хр-м.(импульсная Н3Т метка в среде пс. делений располагается не диффузно, а над опр уч-ками)

9. Изучение репаративного синтеза ДНК при УФ-облучении клеток→не > ½ хр-м клетки облуч-ся перед делением, облученная клетка поглощает Н3Т до синт. периода , т.к. репартивный синтез, причем ввключ-я неравномерно, в соотв с пораж. хр-мами.

10. Прямые биохим данные: при опр-и мах М ДНК дрозофиллы→1хр-ма–1ДНК, длина-const в митозе и интерФ

14. Клеточный цикл, его стадии и способы изучения

-время сущ-я кл.как таковойот деления до деления = клет.цикл (бактерия-20мин, стентор-2-3сут.)

-смысл кл-ного деления - в равномерном распр-и редуплиц. кл-ного мат-ла по 2м новым клл.

→G1→S→G2постсинтетич/премитотич{→G0 Ф пролиферативного покоя, откр. Lagta-R2}→ M{→G0-R(est)1} →G1пресинтетич/постмитотич→

--продолжительность ФФ сильно варьирует у разл.клл, но ~ одинакова у клл. 1 органа

-разл.содерж-е Д/РНК и интенс-сть их синтеза (по ФФ):

G1 - 2c(ДНК), S↑(РНК),S(1/4→1)max(белок)

S - (2→4)c, S(ДНК), Smax(РНК),Smax(белок)

G2 - 4c, Smax(РНК), S(1/4→1)max(белок)

M - (4→2)c, 1/4Smax(белок)

-G1-рост кл., подготовкак синтезу ДНК(синтез белка-инициатора S?), синтезы ферментов метаболизма РНК и белка, ферм.,необх для обр-я ДНК

-S –етсь всегда(искл.-2е деление мейоза), длительность ~v репл.ДНК(ч-лу репликонов), v(полипл.)=v(дипл.); синтез гистонов в цитопл., синтез рРНК(необх в G2)

-G2 –обычно короче ост.периодов, м. Выпадать; синтез кл-ных РНК и белков, синтез иРНК (для М), рРНК из S исп-ся для синтеза «белков деления»(напр.тубулинов для М веретена)

-G0 –дифф.клл, либо “в покое”(могут делиться)

-способы изуч-я:

1)метод получения гетерокарионов (с помощью инактивированных вирусов) из 2х разл клл.=> индуцированное влияние со ст-ны цитоплазм факторов

2) включение Н3-предшественников (синтезов Д/РНК)

{М-деление, ост. -интерФ}

15. Мейоз(МЗ), последовательнось фаз мейоза и его значение

-МЗ-2 клет.цикла, клл.делятся, но репл-ся только 1 раз

-процесс МЗ-а универсален для всех ЭУ орг-мов

-одна из специализаций- пол.клл., команда – оч.рано (циклоп-пс.4го деления, дрозофилла – ранняя бластула, ч-к – до заклкдки всех органов - в каудальном отделе)

-Август Вейсман: (для пол клл.) 1е делелние МЗ 2n→{S}→4n→{ProI(длинная профаза)}→{MI}→2*2n→ {нетS}→2*2n→{MII}→4*n (единица репл.–хр-ма)

--первичн.зарод.клл. →гонии→ауксоциты→(синапсис) →мейотич.деление→гаметы(рост ооцита, дифф. сператоцита)

--обр-е зиготы: ♀(1n)+♂(1n) →2n→(S)→4n→(M) →2*2n

-ProI сост.из неск.уч-ков:

1) лептотена(тонк.нить); «хр-мный букет»

2) зиготена(соед.нить); объед.матер. и отцовск.(1-1)

3) пахитена(толст.нить); длинная у ч-ка и мыши, обр-ся синаптинемный комплекс(характ для МЗ, 0.6 Σt)

4) диплотена(двойная нить); центромерные уч-ки отталкиваются , связь - хиазмы

5) диплокинез(расхождение хр-м);

-МЗ(отличия от М):

1) ProI – длительная (сом.0.5-1.5ч, пол.-до 50 лет)

2) многофазность

3) коньюгация хр-м(рекомбинация) – кроссинговер в местах хиазм, “обмен кусочками” в тетраде, между сестринскими невозможен

4) активация транскрипции (в М синтез РНК резко падает, в МЗ - всплеск)

5)синтез ДНК (отложенный=задержанный)-(заполнение пробела, v синтеза ДНК различна для 2х нитей )

6) диплотенная хр-ма – ст.”ламповых ёршиков”

“ёршик” обр. петля ДНК, на к-рой идет синтезРНК

16. Кариотип, методы его изучения

-совокупность числа, величины и морфологии хр-м («лицо вида»)

-даже у близких видов хр-мные наборы отличаются по ч-лу, по величине 1 или неск-ких хр-м, по форме и по структуре хр-м=>структ. кариотипа м.б. таксономич. признаком.

=методы: 1)Q-окраска (по Касперссону): обработка перпарата митотических хр-м флюорохромом акрихинипритом -> флюоресцентный микроскоп -> поперечные светящиеся полосы

2)G-окраска(к AT-парам) (по Гимза): обработка трипсином, к-той или щелочью, затем – смесью по Гимза: метилен-азур, метиленовый фиол-й, метиленовый синий, эозин –окрашиваются уч-ки в плечах и теломерах хр-м

2’)C(convert↑)-окраска (=?R?(reverse) к GC-парам) –окрашивание прицентромерных уч-ков(~G)

3) гематоксилин или (в проц. удаления Ca2+ Mg2+ под Ф-контрастным микроскопом) – те же полосы, чтот и при G=>дифф.окраска,скорее всего, из-за разл. спос-сти уч-ков хр-м к искусств. деконденсации

-дифф. окрашивание позволяет четко отличить хр-мы друг от друга. Сейчас составляют хр-мные карты ч-ка, т.е. находят места генов на опр. уч-ках хр-м.

-молек. мех-мы специфич.(дифф.) окраски неизвестны. Сущ. теория, что окраш-е связано с хим. св-вами уч-ков хр-м(олаклизацией гетероХ)

18. Митоз, мех-м дв-я хр-м в этом процессе

-подготовка к М:

1)S-репл.ДНК, 2) удвоение центросом(S→G1),

3) смена цитоплазм.МТ на митотич.(G2),

4) синтез и активация факторов регуляции М,

5) рост клл.: акт.процессы транскрипции и синтеза белка (весь кл.цикл, в М-на ½ меньше)

6) удвоение прекинетохоров

- митоз:

1)конд.хр-м(нач.вG1;в раней проФ,max-в метаФ)

2) распад ядрышка и ядерн. облочки

3) форм-е кинетохоров(удвоение прекинетохоров в G2, проФ/прометаФ-процесс, метаФ-зрелый)

4) форм-е веретена

5) конгрессия–выстраивание хр-м в метаФ-ную пласт.

6) расхожд.хр-м – анаФ - сегрегация

7) цитокинез –телоФ

Все этапы сопровождаются акт-стью факторов М

--(4) миотич.веретено сост. из разл-ся МТ, обр-ся при его форм-и

-G2-появл. астральные МТ и «звезды».Расхождение за счет белка кинезина (к «+»концу)

-Кх связ-ся с МТ и прибл.к полюсу, затем уходит (I-много МТ или II-сущ. спец.белки хромокинезины – точно неизв.). Приблизившись к др. полюсу, Кх присоед-ся к МТ

-монополярное дв-е=>возникают межполюсные МТ, появл.интерзональные МТ(оторванные от полюсов)

-АнаФ:А)расхожд.хр-м к полюсам–динеины(к «-» конц) , КхМТ укорачивается на «+»конце(фотоблитчинг)

Б) расхожд.полюсов – в интерзон-х обл. межполюсные МТ удлинн-ся и расход-ся к полюсам, раб. кинезины

-ТелоФ(цитокинез) – начинается обр-е ЯО

22.Судьба органелл при митозе

-сист. цистерн и каналов ЭПР резко редуц. во время М, распадается на разрозненные вавкуоли и небольшие цистерны

-АГ распадается на отд. диктиосомы

-по мере развития митотич. веретена мембр.эл-ты ядра и органоиды всё больше оттесняются к перферии клетки, т.к. её центр часть занимается огромным кол-вом МТ

-В метаФ палзм. мембраны, МХ, лпастиды, лизоссомы локализованы в полярных зонах клеток или по их периферии(обрамляя веретено деления)

-в зоне веретена(осн.–ок. полюсов, м.б. между пучками МТ или в середине веретена ) –мелкие пузырьки и рибосомы (попали пассивно) –содерж. РНК и липиды

-при делении кл.-пассивное распр-е органоидов по дочерним клеткам (м.б. деление МХ вместе с цитотомией – нитчатые МХ водорослей)

=наруш-е Фаз М ->пат.изм-я клл.

-м.б. ассиметр. передача – 1-е деления оплодотв. яйца нематоды Caenorhabditis elegans

23. Проблема автономности хлоропластов(ХЛ) и митохондрий(МХ)

A)МХ

-МХ имеет сист.синтеза белков (ДНК,РНК,рибосомы)

Специфичность этой сист.и её автономность-в резком отличии от таковой в клетке

--МХ-ная ДНК(богата ГЦ)не гибридизуется в ядерной, это небольшая циклическая м-ла

--синтез МХ-ной ДНК не зависит от синтеза ядерной(внутри МХ, на своих ферментах, часто не совп. по t)

--в МХ сущ.иРНК,тРНК,рРНК;рибосомы и рРНК у МХ резко отлич. от (~) в цитоплазме: 80S-70S(30S+50Ssub, 16S+23SRNA)-50S-рибосомы цитоплазмы, раст.МХ и жив.МХ соотв.

--синтез на МХ-ных рибосомах прекращ.при действии Cl-амфеникола(прекр.синтез у бакт.)

-{Альтман-"биобласты"}Предполаг.,что на заре эвол. произошло внедр-е в кл-анаэроба прокариотич. симбионта,облад.ферментами (цикла Кребса и окисл. фосфорилирования).

В дальнейшем происходило закрепл-е "союза" и перестройка его :МХ потеряли часть генетич.мат-ла,превратились в структ.с огранич.автономией

--малые размеры ДНК МХ не позволяют кодировать всех МХ белков=>доказано,что б.ч. белков-под генетич.контролем клет.ядра (больш-во раств.белков МХ,напр. цитохром с) и синт.вне МХ

--предст.,что МХ-ная ДНК кодирует МХ-ные белки,локализ.на мембранах и предст собой структ.белки,ответств. за правильную интеграцию в МХ-ных мембранах отд.функц.компонентов

Б) ХЛ

-у ХЛ сущ.сист.синтеза белка,отличная от такой же в кл.

--ДНК-небольшая линейная или циклич.м-ла, в 1ХЛ м.б.неск-ко копий, не сост. в комплексе с гистонами

--длительность цикла и Vрепликации не совпадает у ядерной у ХЛ-ной ДНК

--рибосомы 70S(см.↑)чувствительны к Сl-амфениколу

--ХЛ возникли за счет объед-я гетеротрофов с прокариотич.СЗ водорослями

--ХЛ оч.похожи на СЗ водоросли; сущ.истинный эндосимбиоз СЗводорослей с клл.низш.жив-ных, моллюсками, коловратками

-ХЛ-структ.с огранич. автономией

--синтез ряда важнейших белков, ферм.(хлорофилл, каротиноиды, липиды, крахмал)=>метаболизм находятся под генетич.контролем ядра

--ядерные гены кодируют ДНКполимеразу и нек-рые аминоацил-тРНК-синтетазы ХЛ и рибосомные белки

-МХ включались одновременно с обр-ем ядра(из генофора), а ХЛ - ПОЗЖЕ.

24.Вакуоли растительных клеток

-у молодых клл. м.б. неск-ко мелких вакуолей (обр. из АГ), по мере роста слив-ся в 1/неск-ко крупных (Σ до 80%), отдел. от цитоплазмы тонопластом(~плазм. мембране)

-полость В заполнена т.н. клет.соком(соли, сахара, орг.к-ты, белки, вода)

-Ф-ции:1)поддерж-е тургора(соли), 2)резервуар для пит.в-в, отходов, метаболитов-опиум (алкалоиды, полифенолы, глюкозиды, оксалаты, цитраты, фосфаты=>pH(2-5)), 3)увеличение размеров, 4) аутофагич.ф-ция: протеиназа и РНК-аза, м.переваривать часть себя и дефектные клет. компоненты(~лизосома!)

-алейроновые В запасают белки: альбумин и глобулин, затем обезН2Ося ->алейроновые зерна (~крахм.зерна)

-в 1 кл. м.б. ВВ с разл. ф-циями (лизосома, хранилище)

26. Ультраструктура митохондрий(МХ), функции

-МХ как органеллы синтеза АТФ характерны, за малым искл., для всех эукариотов. Их осн. ф-ция– окисление органики и исп-е Е для синтеза АТФ.

-МХ окрашивают по Альтману пс. осмиевой фиксации (липиды) или флюорохромом родамином (только активные)

-МХ имеют разл форму, подвижны, м. сливаться

-у анаэробов МХ нет, при слиянии м. обр-ся 1 хондросома

=МХ имеет 2-мембр замкнутую оболочку(по 7 нм), между ними межмембр. простр-во(10-20 нм), внутри-впячивания- кристы(расст. между 2-мя–10-20 нм), под ними матрикс(жидкий)

-Кристы связ-ся с внутр. мембраной через узкую шейку или стебелек

-Кристы м.б. по-разному ориентированы к дл. оси: 1) ┴ (печень, почки), 2)продольно(кардиомиоцит), 3)ветвление, пальцевидные отростки, 4) нет выраженной ориентации.

-Внутр.мембрана содержит 3 типа белков:

1)катализирующие окислительные р-ции в дых. цепи, 2)ферментный комплекс-АТФ-синтетаза,

3)специфич.транспортные белки, регулирующие перенос метаболитов в матрикс и из него.

-Матрикс имеет тонкозерн. гомогенное стр-е, содержит тонкие(2-3нм) длинные нити ДНК, мелкие гранулы(15-20нм)-МХ-ные рибосомы, крупные плотные гранулы (20-40 нм)-соли Са и Мg, тРНК, ферменты

-Наруж.мембрана–содержит порин, обр.каналы для в-в (m<10кДа), ферменты синтеза МХ-ных липидов и переводящие липиды в субстрат для матрикса

-Межмембр.прост-во-неск-ко ферментов, исп-щих выходящий из матрикса АТФ для фосфорилирования др.нуклеотидов

=ф-ции: 1)синтез АТФ в рез- те окисления органики и фосфорилирования АДФ (аэробное окисление, цикл Кребса)

29.Стр-е и ф-ции гладкого ЭР(глЭР)

-ГлЭР–часть мембр-й ретик-й системы ,нет рибосом

-ГлЭР–мемб., обр.мелкие вакуоли, трубки, канальцы(d ок.50-100 нм), м.ветвиться, сливаться

-выраж-сть глЭР в клл. и тканях –разл., обычно скопл-е в опр. месте кл.: эпит. кишечн – вблизи всас.пов-сти

-непр-сть перехода между глЭР и грЭР, от переход. уч-ка отрыв-ся пузырьки с белками или липидами →АГ

--глЭР образован гранулярным, т.е. вторичный

-ф-ции: 1) метаболизм липидов и нек-рых внутриклет. п-сахаридов (продукты м.накапливаться в полостях) 2)синтез стероидов(корковое в-во надпочечников, сальные железы, семенники), 3)метаболизм углеводов (топограф.связь глЭР с отл-ями гликогена в клл.печени), 4)процессы деградации разл. вредных (цитохром Р450) вещ-в, метаболич. дезактивация – гепатоциты, 5) депо Са2+ (поперечно-полосат. мм.; глЭР=саркоплазм. ретикулум), (6)раст. (участие?) синтез и транспорт терпенов, стероидов, липидов

-избыток мембран пс.(4) разрушается аутофагосомами

30.Стр-е и ф-ции гранулярного ЭР(грЭР)

-(ультратонкий срез):замкн.мембраны, на сеч-мешки,цистерны,узкие каналы,ширина от 20 нм до неск.μ–от акт-сти кл.

-со ст-ны гиалоплазмы покрыт рибосомами(20нм)-темные округлые частицы; рибосомы собраны в полисомы (п рибосом, объед-х 1 иРНК) в виде спиралей, розеток, гроздей; кол-во рибосом на грЭР ~ акт-сть кл. (падение кол-ва м.б.при дифференцировке)

-в кл.грЭР м.б.в виде 1) редких разрозненных мембран, 2)локальных скопл-й таких мембран (эргастоплазма)

--1)характ для клл. с низкой метаболич. акт-стью, либо недифференцированных

--2)свойств.клл, синт.секреторные белки (гепатоциты-тельца Берга(скопл-я грЭР))

{грЭР–тяжелая микросомальная фракция, «шероховатые микросомы»}

-грЭР – одно из мест синтеза белка(т.к.полисомы)

-- рибосомы/полисомы в гиалоплазме (обычно недифф. клл.) обычно синтезируют белок «для себя», а на грЭР– «экскретируемые»: протеиназы, липазы, нуклеазы, казеин, γ-глобулин

-грЭР сущ. у простейших (ферменты внеклет пищевар-я,белки и гликопротеиды гликокаликса), жив, раст.(железист.клл.)

-Ф-ЦИИ(Σ):

1) синтез «экскреторных»,в т.ч. «ненужных» белков

2)синтез белков-ферментов для внутриклеточного пищеварения (лизосомы)

3)сегрегация и обособление синтезированных белков, изоляция их от осн.функц.белков клетки

-у млекопит импорт белков в ЭР котрансляционно, связ-е грЭР с иРНК только при наличии сигн.послед-сти

31.Стр-е и ф-ции АГ

-открыт в 1898 К.Гольджи и Рамон-и Кахалом («сетчатая структура»), методом импрегнации–осажд.Os/Ag+на нейронах

-стр-е

--АГ может иметь(сетч.структ, в ссекр.клл.) или не иметь(диффузная структ.) полярность, характ для любых клл.,в т.ч. дрожжи, для раст.-по периферии

--плоские цистерны (по краям ампулы), 1 на другой(∆= 20-25нм,5-10шт-до20); нет рибосом; диктиосомы (ср.20шт.на 1 кл.)– компонент АГ, полярны, если полярен АГ

--АГ обр-ся из IAGIC(зона между ЭР и АГ)

--сущ. 3 зоны: промежуточная, цис(тяжелее транс) и транс(крупнее цис)

--трансАГ окружен сист вакуолей TGN (trans Goldgi network),здесь разделение и сортировка

-Ф-ЦИИ:

--АГ работает «на выброс» из кл.(Д.Н.Насонов-витальный краситель+импрегнация Ag+)

--белковые секреты синтезируются в грЭР и через АГ выходят наружу (в секреторных гранулах ) (Леблонд-ЭМ+радиоавтография, зимоген.гранулы)

--в зоне АГ происх вторичная модификация белков и обр-е полигликанов(мукопротеидов)

---(1)фосфорилирование,(2)потеря части манноз{цис-для лизосом}, (3)замена манноз на N-Aсглюкозамины {промежут.},(4)+галактоза, (5)+сиаловые к-ты {транс-}, (6)→вTGN→в мембр. →в секреторные пузырьки

--синтез гемицеллюлоз(полисазаридов,слизи,муцинов) →в кл-ную ст.или промежут в-ва

--сегрегация (лизосомы, наружу,в цитоплазму)-по олигосахаридным маркерам(в т.ч. при модификации)

!секреция 1)лизосомы, 2)поток пост.секреции, 3)поток контр.секреции

32.Лизосомы,их классификация и стр-е

-открыты случайно,Х.деДюв1955(замораживание легкой макросомальной фракции→ оттаивание→ лизис)

-липопротеидная мембр., 40 гидролитич.кислых ферментов(активны при pH5):протеиназы, нуклеазы, глюкозидазы, фосфатазы, фосфорилазы, сульфатазы

-рН создается АТФ-зависимой протонной помпой(в Л2)

-в мембр.Л встроены белки-переносчики, для транспорта продуктов гидролиза в цитоплазму

КЛАССИФИКАЦИЯ:

1)первичные Л

-образуются АГ,содержат неакт. –азы (защищены олигосахаридами опр.стр-я)

-кислая фосфатаза-маркерный фермент(гистохимия)

2)вторичные Л (м.б.у любых клл.) = первичнаяЛ+ фагоцитарная/пиноцитозная вакуоль

-темные, неоднор.структ, «переваривание» м.б.не до конца(см.3)

3)телоЛ(ост. тельца, «недоперевар») -не выводятся

-откладываются пигменты, липиды, напр. липофусциновые гранулы(ч-к)=гранулы старения-в сердце,мозге

4)аутоЛ(аутофагосомы)-клл.прост.,раст.,жив

-(~)вторичнЛ, «переваривают» дефектные комп. клл.

Ф-ЦИИ:

1)переваривание(мономер→полимер),

2)запасные(работают,если есть работа)-гранулоциты (нейтрфилы крови)

3)метаболич.превращение(щитовидная железа:I-тироглобулин→I-тироксин(в кровь)+белок)

-сущ. Л-мные патологии-«болезни накопления»-Л не переваривает ч-л.

41. Процесс обр-я клеточной стенки(КС) растений

-аморфные в-ва матрикса (гемицеллюлозы и пектины) ←АГ, выдел.экзоцитозом

-фибриллы целлюлозы←ферменты плазмалеммы

-КС зрелых клл. обычно многослойные(1,2,3)

=1)при делении клл. пс. расхождения хр-м в экв. плоскости появляется скопление мелких мембр. пузырьков (от АГ, содерж. гемицеллюлозу-аморфное в-во матрикса)

2) пузырьки начинают сливаться(от центра), при слиянии с клет. стенкой образ-ся клеточная пластинка-фрагмопласт

3) в центре фрагмопласта- гемицеллюлоза(срединная пластинка-1ичн оболочка)-за счет материнской кл., по периферии нарастают целлюлозные фибриллы (вторичная оболочка)-за счет дочерних клл., ВНЕ их

4)синтез и полимеризация целлюлозных фибрилл-> утолщение 2-ичн стенки(осн. масса кл-ной стенки), ранее синтезированные фибриллы механически сдвигаются

5)инкрустация 2-ичн оболочки лигнином-> увеличивается жесткость, прекращается растяжение, т.е. синтез и полимеризация фибрилл

(6) обр-е 3-ичн кл-ной стенки из дегенерировавшей цитоплазмы

-1ичн оболочка м. расти от КРАЁВ: спирогира

-протопласт-клетка без КС

-раздел-е клл. КС – не полное, остаются палзмодесмы

42. Стр-е и св-ва кл-ных стенок раст. клл. и бактерий

-КС имеется у прокариотов и клеток раст-й(у прост-х и животных - гликокаликс)

-КС-экстрацеллюлярная структура, лежащая за плазм. мембраной

-КС-продукт жизнедеят-сти кл.: компоненты синт. в кл., выдел.из цитоплазмы и собираются вне кл.вблизи плазм.мембраны, в слож.и неоднород.комплексы (принцип стр-я – армированная резина)

=основа КС- полисахариды (полностью прониц. для воды, солей, органики)

+соли и орг.в-ва (лигнин, кутин) -> жесткость и непроницаемость

-для КС характ. лизирование в гипотонич. р-ре (анти-сократит.вакуоль или нерпониц.КС)

А) растительная КС(РКС)

-РКС-многосл.обр-е,защищ.пов.кл.(«наруж скелет»)

-2 компонента:аморфный палстичный желеобразный матрикс(основа, выс.содерж воды) и опорная фибриллярная сист.; для придания жесткости и несмач-сти м.б.доп. полимеры и соли

-матрикс: гемицеллюлозы (раств.в конц.щелочах) – полимеры из 6оз, 5оз и уроновых к-т, не кристаллизуются и не обр.фибрилл и пектиновые в-ва (полимеры метил-D-глюкоуроната)

-матрикс: мягкая пластическая масса, укрепл. фибриллами

-фибриллы: из целлюлозы (лин.неветв полимер β-глюкозы),М=(5*10Е4-5*10Е6),т.е. 300-3000n; содерж-е целлюлозы 12-90%, сост. из субмикроскопич. фибрилл (25 нм), объед.в пучки или волокна

-доп.компоненты: (инкрустация) лигнин (напр., конифериловый спирт)->одеревеснение, мин в-ва (CaCO3, SiO2), кутин/суберин (на пов РКС-адкрустация) -> опробковение, воск->водонепрониц. слой

Б) КС бактерий (БКС)

-каркас-1 мешковидная мол-ла муреина(полимер N-ацетилмурамовой к-ты и N-ацетилглюкозамина)

-БКС содержит много доп.компонентов

-окраска по Граму:крист.фиолетовый, йод, спирт; окрашено?->грамположительно

-грамториц. БКС:наруж.мембр.из липопротеидов и липосахпридов(содерж порины и рецепторы для Б-фагов),1сл. муреиновая сеть, плазм. мембрана

--наруж мембрана– синтез кнаружи от плазм. мембраны, обесп.структ.целосность кл., барьер

--тримеры порина–перенос м-л до 900 кДа(гидрофильные поры)

--между 2мя плазм мембранами сущ.периплазма (~лизосомам)(~10нм): муреиновый слой (1-3нм), гидролитич. ферменты и трансп.белки(сахара,а-к-ты)

-грамполож.БКС(оч.ЖЕСТКАЯ):толстая полимерная сеть муреина, плазматическая мембрана;сопутств.в-ва:тейхоевые к-ты, n-сахариды, n-пептиды, белки

-в БКС гетеротрофов локализуются ферменты; защитная и каркасная ф-ции

-Гл.отличие РКС. от жив.- осморегулят. ф-ция

-лизоцим раств.КС и муреин

60. Регуляция клет.цикла

- см.14(клет.цикл)

- посл-сть ФФ кл.цикла универсальна=>смена функц-я отд.генов обесп.прохожд-е ФФ => подготовка клл.к делению регулируется на генном ур-не путем послед транскрипций специфич.РНК, а тж.путем регул. трансляции этих РНК и регул. синтеза специф. белков

(изуч-е вл-я ингибиторов синтеза этих РНК и белков)

- в G1 –синтез белка – инициатора S

- если в S-блокада(напр., изб.Т)=>остановка цикла

- синтез в-в для след.Ф Σ в кажд.Ф: G2→M,G1; G1→S; S→G1,G2

- G0 можно заставить вернуться в G1 (индуцир. влияние со ст-ны цитоплазм факторов)

- при получении гетерокарионов(см.14):

S+G1→S; S+G2→(S→G2)+G2; G1+G2→(G1→G2)+G2;

M+G1→M+(M); хр-мы интерФ-ного ядра преждевр.

M+S→M+(M) ; деконд-ся , ЯО разрушается

M+G2→M+(M);

- M запуск-ся MPF(mitosis promоting factor)-в цитопл.